组织胺对蛙平滑肌收缩活动影响研究

本实验将以任氏液作为灌流液人为地加入各浓度组织胺来改变两栖类平滑肌收缩活动的内环境，从而观察平滑肌收缩活动的变化情况。 
　　一、实验部分 
　　1.实验材料 
　　蟾蜍、1∶5000磷酸组织胺、任氏液、生物信号采集系统、电热浴、麦氏浴槽、机械换能器、蛙类手术器械、滴管、烧杯。 
　　2.实验方法 
　　取皮肤湿润、喜爱活动的健康蟾蜍一只，用双毁髓法破坏蟾蜍的脑和脊髓，背位固定在蛙板上。打开体腔，观察蟾蜍消化管的活动情况。在十二指肠起始处将肠管结扎并从结扎线以上剪断至20cm处。用任氏液冲洗肠断中的内容物，再从中间剪断，每次肠断长约2cm，在肠断的两端分别结一个线套，一个用于挂在麦氏浴槽的乙字形管上，另一端结一长线，用于连接张力换能器。在放入离体平滑肌之前，将麦氏浴槽内任氏液温度控制在37～38℃，每取出一段肠后，迅速将其放入调节适温打的任氏液中。张力换能器的输出端与生物信号采集系统的一个输入通道相连。固定结扎线与张力换能器使肠断运动正常。打开计算机，开始记录平滑肌收缩曲线。 
　　3.实验观察 
　　（1）记录离体平滑肌在灌流37～38℃任氏液后收缩曲线，观察收缩频率及幅度，作为对照。 
　　（2）加入1∶5000磷酸组织胺1～2滴，记录并观察收缩活动变化。 
　　（3）等量任氏液换洗，待收缩活动恢复正常后，加入1∶5000磷酸组织胺3～4滴，记录并观察收缩活动变化。 
　　（4）等量任氏液换洗，待收缩活动恢复正常后，加入1∶5000磷酸组织胺5～6滴，记录并观察收缩活动变化。 
　　（5）等量任氏液换洗，待收缩活动恢复正常后，加入1∶5000磷酸组织胺7～8滴，记录并观察收缩活动变化。 
　　二、结果 
　　消化道平滑肌在任氏液中收缩缓慢而不规则。向麦氏浴槽中滴加入各浓度组织胺后发现收缩活动逐渐依次增强，收缩曲线基线逐渐依次上移，收缩频率逐渐依次加强。 
　　三、讨论分析 
　　两栖类消化道平滑肌，对于一些理化刺激敏感。组织胺，组织胺受体有H1～H4四种亚型，组织胺激活H1受体，，通过G蛋白而激活磷脂酶C，产生肌醇三磷酸与二酰甘油，导致细胞内Ca2+增加，蛋白激酶C活化，进而引起了消化道平滑肌兴奋，收缩频率和强度加强。 
　　参考文献： 
　　[1]孙永久，黄玉芝.生理学实验[M].北京大学出版社，2005. 
　　[2]魏香，谢佐平，苏付荣.生理学实验指导[M].北京：清华大学出版社，2005. 
　　[3]莫书荣.实验生理科学[M].北京：科学出版社，2009.